35硝基水杨酸法测定还原糖-3,5二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量

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-二硝基水杨酸比色法测定糖含量是糖含量时应乘以0.9，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定。在540nm 波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。

-二硝基水杨酸比色法测定糖含量是糖含量时应乘以0.9，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定。还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3，5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。

（图片来源网络，侵删）

样品中糖浓度偏小。试验中样品的糖浓度会影响还原糖含量数据结果，所以样品糖浓度偏小会导致数据结果偏小。实验会受到很多因素的影响，在选择样品糖的时候建议选择糖浓度适中的样品糖，可以让结果数据更加准确。

1、DNS法即3，5-二硝基水杨酸比色法。原理是3，5-二硝基水杨酸在中性或偏碱性条件下与多糖水解的还原糖共热后被还原成棕红物质。

2、-二硝基水杨酸比色法原理：还原糖在碱性条件下，自由的醛基酮基会变成非常活泼的希二同类不具有醇，后者具有极强还原性可以使3，5二硝基水杨酸还原。

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3、-二硝基水杨酸，3，5-Dinitrosalicylic acid ，简称DNS。在碱性条件下，还原糖与3，5-二硝基水杨酸共热，3，5-二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸（棕红色物质），还原糖则被氧化成糖酸及其它产物。

4、- 二硝基水杨酸比色法。蔗糖酶酶解所生成的还原糖与 3，5- 二硝基水杨酸反应而生成橙色的3-氨基-5-硝基水杨酸。颜色深度与还原糖量相关，因而可用测定还原糖量来表示蔗糖酶的活性。

5、可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定。还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3，5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。

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1、二硝基水杨酸比色法 3，5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物，再一定范围内，还原糖的量与反应液的颜色强度成比例关系，利用比色法可测知样品的含糖量。

2、显色和比色：取3支25mL刻度试管，编号，分别加入还原糖待测液2mL，35二硝基水杨酸试剂5mL，其余操作均与制作标准曲线相同，测定各管的吸光度。

3、多糖含量的测定粗多糖中的总糖含量使用苯酚-硫酸法进行测定，还原糖用3，5-二硝基水杨酸（DNS）法测定，多糖含量 = 总糖 - 还原糖。

1、因为比色分析的定量依据是朗博--比尔定律；仅适用有色物质；测定时要扣除比色皿及其非待测物的吸光度，才能用于朗博--比尔定律；设置空白管，就是得到：扣除比色皿及其非待测物的吸光度的作用。

2、空白实验对照可以调整实验仪器分光光度计的零点，排除显色溶液中其他物质和其他条件的干扰，消除系统误差。

3、显色和比色：取3支25mL刻度试管，编号，分别加入还原糖待测液2mL，35二硝基水杨酸试剂5mL，其余操作均与制作标准曲线相同，测定各管的吸光度。

4、---二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物，在一定范围内，还原糖的量和反应液的颜色强度呈现比例关系，利用比色法可测知样品的含糖量。该方法是半微量测糖法，操作简便，快速，杂质干扰较小。

5、还原糖和总糖的测定（3，5-二硝基水杨酸比色法）是实验如下包含实验目的，原理，试剂，材料。实验目的掌握还原糖和总糖测定的基本原理。学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。

1、用3，5-二硝基水杨酸定糖法测定还原糖含量时，使用的波长是（）nm。

2、显色和比色：取3支25mL刻度试管，编号，分别加入还原糖待测液2mL，35二硝基水杨酸试剂5mL，其余操作均与制作标准曲线相同，测定各管的吸光度。

3、DNS法利用的是还原糖与3，5-二硝基水杨酸发生氧化还原反应显色。所以，DNS法就会先测出还原糖的含量。

4、因为5二硝基水杨酸是有颜色的，必须用空白管做对照，才能最后测定还原糖的浓度。

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