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谷物萌发时淀粉酶活性的测定
1、谷物***萌发时淀粉酶活力的测定几乎所有植物中都存在淀粉酶,尤其是萌发的禾谷类***,淀粉酶活性最强。主要是α-淀粉酶和β-淀粉酶。***萌发时,淀粉酶活性随萌发时间迅速增加,将淀粉分解成小分子糖类,供幼苗生长。
2、本实验以萌发***为材料,测定其中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异。【原理】两种淀粉酶具有不同理化特性,α-淀粉酶不耐酸,在PH36以下迅速钝化;β-淀粉酶不耐热,在70℃下15Min则被钝化。
3、酶活性的测定是通过测定一定量的酶在一定时间内催化得到的麦芽糖的量来实现的,麦芽糖的浓度利用比色法可以很容易测得。
4、淀粉酶活力测定具体步骤如下:材料、仪器设备及试剂 材料:萌发的小麦***(芽长约1cm)。仪器设备:分光光度计;离心机;恒温水浴;具塞刻度试管;刻度吸管;容量瓶。
5、将淀粉酶0.5ml加到30℃的淀粉液中,混匀,在30℃水浴中保温,自加入记时,经5 分钟后取反应液1毫升,加入盛有5毫升稀碘液的试管中。
6、所以在禾谷类萌发的***和幼苗中,这两类淀粉酶都存在。小麦萌芽后淀粉酶的活力会比萌芽前明显增强。这是***内的淀粉转化为低级糖,参与日益增强的生理活动的前提。其实像α-淀粉酶是萌芽期间新合成的。
纤维素酶活力用什么方法测定?
.C1 酶活力的测定 将5mg/mL 的原酶液稀释10~15 倍后用于测定C1 酶活力,以脱脂棉为底物。
土壤纤维素酶活性的测定方法包含以下步骤: 准备醋酸缓冲液、CMC溶液、水合葡萄糖溶液等试剂,恒温培养箱,水浴锅,分光光度计,搅拌器,三角瓶等设备。
纤维素酶活的活性检测方法 纤维素CMC酶 0标题 用5一二硝基水杨酸法测定纤维素CMC酶活性单位。 0范围 生产分析和质量控制部门适用。
样品酶活的测定取纤维素酶粉5g,充分碾细,加100ml蒸馏水,与40℃水浴中,搅拌3Omin,使酶蛋白充分溶出,过滤,离心取上清液,稀释至恰当倍数。
南京大学生化实验一:总糖和还原糖含量的测定
总糖和还原糖含量的测定实验报告实验目的:植物体内的还原糖,主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。它们在植物体内的分布,不仅反映植物体内碳水化合物的运转情况,而且也是呼吸作用的基质。还原糖还能形成其他物质如有机酸等。
总糖和还原糖的测定方法有滴定法和光谱法。一 、滴定法 样品处 将样品研磨成粉末,用热水溶解,再用蒸馏水定容。
我们日常生活遇到的单糖和麦芽糖都叫作还原糖,蔗糖还有淀粉这俩都是非还原糖,他们利用溶解度是不同的。
总糖和还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。日常生活遇到的单糖和麦芽糖都叫作还原糖,蔗糖还有淀粉这俩都是非还原糖,他们利用溶解度是不同的。
3,5-二硝基水杨酸试剂测定
1、显色和比色:取3支25mL刻度试管,编号,分别加入还原糖待测液2mL,35二硝基水杨酸试剂5mL,其余操作均与制作标准曲线相同,测定各管的吸光度。
2、---二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内,还原糖的量和反应液的颜色强度呈现比例关系,利用比色法可测知样品的含糖量。该方法是半微量测糖法,操作简便,快速,杂质干扰较小。
3、也可用于生物质中半纤维素含量的测定。它们均要与标准葡萄糖曲线进行比对。
4、-二硝基水杨酸比色法测定糖含量是糖含量时应乘以0.9,可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定。在540nm 波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖和总糖的含量。
5、DNS试剂的配方是:称取3,5-二硝基水杨酸15 g(化学纯),加水500 mL。搅拌5 s,水浴至45 ℃。然后逐步加入100 mL 0.2g/ mL的氢氧化钠溶液,同时不断搅拌。DNS试剂,一种可用于物质中还原糖含量测定的试剂。
6、通过测定波长为540nm处“标准葡萄糖浓度梯度的吸光度”和样品溶液的吸光度,绘制标准曲线,查对标准曲线并计算,便可求得样品中还原糖的含量。 3,5-二硝基水杨酸,3,5-Dinitrosalicylic acid ,简称DNS。
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