3,5-二硝基水杨酸比色法测定糖含量误差分析-3,5二硝基水杨酸比色法测定糖含量实验报告

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-二硝基水杨酸比色法测定糖含量优缺点如下：淀粉酶是水解淀粉中的糖苷键的一类酶的总称，按照其水解淀粉的作用方式，可以分成α淀粉酶、β淀粉酶等。α/β是其中最主要的两种，广泛存在于禾谷类的***中。

-二硝基水杨酸比色法：优点是直观，可以直观的看到具体的颜色。缺点是操作起来麻烦，需要的材料太多。

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***用蒽酮-硫酸法测定杜仲水提液中总糖含量，3，5-二硝基水杨酸法测定杜仲水提液中单糖含量，多糖含量为总糖与还原糖含量之差。该法简便、快速、准确、稳定，所用材料、过程都不一样。

还原糖和总糖的测定（3，5-二硝基水杨酸比色法）是实验如下包含实验目的，原理，试剂，材料。实验目的掌握还原糖和总糖测定的基本原理。学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。

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显色和比色：取3支25mL刻度试管，编号，分别加入还原糖待测液2mL，35二硝基水杨酸试剂5mL，其余操作均与制作标准曲线相同，测定各管的吸光度。

一实验目的掌握蒽酮比色法测糖的原理和方法二实验原理蒽酮可以与游离的已糖或多糖中的已糖基、戊糖基及已糖醛酸起反应，反应后溶液呈蓝绿色，在620nm处有最大吸收。

可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定。还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3，5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。

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该实验为标准曲线法求得浓度值，所以曲线的斜率直接关系到最后结果，应注意对比和其他组的实验标准曲线；标准曲线的绘制又与标准溶液的配置有关，最后建议该类实验多做几次。DNS反应产生的OD值应在0.2-0.8之间较稳定。

还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3，5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计。

一般煮沸时间越长，显色越深。没有必要长时间冷却，冷却下来了，就可以了，冷却是为了终止反应，保证每个反应时间都一样。数据偏小，如果标准曲线正常的话，可能是样品中糖浓度小了，要么试剂配的有问题。

显色和比色：取3支25mL刻度试管，编号，分别加入还原糖待测液2mL，35二硝基水杨酸试剂5mL，其余操作均与制作标准曲线相同，测定各管的吸光度。

1、该实验为标准曲线法求得浓度值，所以曲线的斜率直接关系到最后结果，应注意对比和其他组的实验标准曲线；标准曲线的绘制又与标准溶液的配置有关，最后建议该类实验多做几次。DNS反应产生的OD值应在0.2-0.8之间较稳定。

2、-二硝基水杨酸比色法测定糖含量是糖含量时应乘以0.9，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定。在540nm 波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。

3、一般煮沸时间越长，显色越深。没有必要长时间冷却，冷却下来了，就可以了，冷却是为了终止反应，保证每个反应时间都一样。数据偏小，如果标准曲线正常的话，可能是样品中糖浓度小了，要么试剂配的有问题。

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