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3,5-二硝基水杨酸比色定糖法实验报告
1、***用蒽酮-硫酸法测定杜仲水提液中总糖含量,3,5-二硝基水杨酸法测定杜仲水提液中单糖含量,多糖含量为总糖与还原糖含量之差。该法简便、快速、准确、稳定,所用材料、过程都不一样。
2、还原糖和总糖的测定 (3,5-二硝基水杨酸比色法) 是实验如下包含实验目的,原理,试剂,材料。实验目的 掌握还原糖和总糖测定的基本原理。学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光 度计的使用 。
3、显色和比色:取3支25mL刻度试管,编号,分别加入还原糖待测液2mL,35二硝基水杨酸试剂5mL,其余操作均与制作标准曲线相同,测定各管的吸光度。
4、-二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物,再一定范围内,还 原糖的量与反应液的颜色强度成比例关系,利用比色法可测知样品的含糖量。
5、可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定。还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物,3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
3,5-二硝基水杨酸比色法测定糖含量优缺点
-二硝基水杨酸比色法测定糖含量优缺点如下:淀粉酶是水解淀粉中的糖苷键的一类酶的总称,按照其水解淀粉的作用方式,可以分成α淀粉酶、β淀粉酶等。α/β是其中最主要的两种,广泛存在于禾谷类的***中。
-二硝基水杨酸比色法:优点是直观,可以直观的看到具体的颜色。缺点是操作起来麻烦,需要的材料太多。
还原糖和总糖的测定 (3,5-二硝基水杨酸比色法) 是实验如下包含实验目的,原理,试剂,材料。实验目的 掌握还原糖和总糖测定的基本原理。学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光 度计的使用 。
---二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内,还原糖的量和反应液的颜色强度呈现比例关系,利用比色法可测知样品的含糖量。
二硝基水杨酸(DNS)与还原糖发生氧化还原反应,生成3-氨基-5-硝基水杨酸,该产物在煮沸条件下显棕红色,且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理,用比色法测定还原糖含量的。
3,5-二硝基水杨酸比色法测定糖含量是多少?
-二硝基水杨酸比色法测定糖含量是糖含量时应乘以0.9,可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定。还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物,3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
-二硝基水杨酸比色法测定糖含量是糖含量时应乘以0.9,可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定。在540nm 波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖和总糖的含量。
还原糖在碱性条件下加热可被氧化成糖酸及其它产物,而氧化剂3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
显色和比色:取3支25mL刻度试管,编号,分别加入还原糖待测液2mL,35二硝基水杨酸试剂5mL,其余操作均与制作标准曲线相同,测定各管的吸光度。
测定值无明显差异,但后者要比前(2-5分钟)数值要高30%左右。DNS浓度宜控制在1-2%之间。总之,在实际测定过程中,测定的结果与测定的条件有关,***用不同的测定条件会得到不同的结果。
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