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用茚三酮法测蛋白水解度应该怎样做?步骤和计算公式?
1、测定蛋白质水解程度的方法是茚三酮法。茚三酮法是利用待测蛋白样品完全水解液做为茚三酮比色的标准样品测定蛋白质的水解度。
2、配置已知浓度蛋白质标准溶液,跟未知浓度蛋白质溶液,分别与茚三酮水化物混合加热,生成蓝紫色,在分别测定吸光度(570nm)C已知/C未知=d已知/未知。。
3、双缩脲反应(biuret reaction)。蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与硫酸铜共热,呈现紫色或红色,此反应称为双缩脲反应,双缩脲反应可用来检测蛋白质水解程度。 茚三酮反应(ninhydrin reaction)。
4、通常有三种方法:(1)茚三酮反应(ninhydrin reaction)蛋白质水解后产生的氨基酸可发生茚三酮反应。除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应生成***物质外,所有的α氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。
甲醛滴定法多肽水解度计算公式
1、水解度=发生水解的离子数/离子总数=[(10^-5)-(10^-7)]/0.1*100%约为0.01%。
2、水解度( Degree of hydrolysis,DH)代表水解过程中蛋白质肽键被裂解的程度,常用百分数来表示:DH =h/htot× 100%。式中,h是水解后每克蛋白质被裂解的肽键数,毫摩尔数(mmol/g)。
3、=100x/(100x+10x)=0.9090 所以此弱碱性药物药物的解离度为91%(0.9090)。
4、离解度的计算公式为:α=(已离解的分子数/已离解的分子数+未离解的分子数)×100%。这个公式可以用来计算在一定条件下,某物质在溶液中的离解程度。
5、一般常用此法测定蛋白质水解程度,随着水解程度的增加滴定值增加,当水解完全后,滴定值即保持恒定。甲醛滴定法***用的甲醛浓度为0-0mol/L,即滴定后最终浓度为6 %-9 %。
6、滴定酸度计算公式是总酸度(%)=C*(V1-V2)*K*V3*100mV4,在水中,由于溶质的解离或水解(产生无机酸类、硫酸亚铁和硫酸铝等)而产生氢离子,这些氢离子与碱标准溶液作用至一定pH值时所消耗的量,即定义为酸度。
计算25℃时0.10mol/L的碳酸钠溶液的水解度
已知碳酸钠在常温下电离常数K1=3*10^-7,K2=6*10^-11。即碳酸钠在常温下的水解程度约是10%,水解产生的氢氧根离子的浓度大约是0.01mol/l,所以得ph=12左右。
弱酸弱碱盐的水解度大,溶液的pH更接近7(常温下)。如0.10 mol/L的Na2CO3的水解度为2%,pH为16,而同一浓度的(NH4)2CO3的水解度为92%,pH为3。
若两者的水解倾向相同,则溶液呈中性,这是个别情况,如乙酸铵。弱酸弱碱盐的水解与相应强酸弱碱盐或强碱弱酸盐的水解相比,弱酸弱碱盐的水解度大,溶液的pH更接近7(常温下)。
测定聚丙烯酰胺水解度一般消耗盐酸的量???
1、一般加入不同的碱量,即可制得不同水解mOl/l;V为试样溶液消耗标准盐酸溶液的体积,度的APAM。
2、一般将水解比控制在20%左右,水解时间控制在2~4h。
3、聚丙烯酞胺HPAM粉剂、分子量900万,水解度25%一30%。次氯酸钠溶液选用分析纯级的次氯酸钠溶液,用蒸馏水配制成重量浓度为31%的次氯酸钠溶液。醋酸溶液选用分析纯级的冰醋酸,用蒸馏水配制成浓度为5mol/L的醋酸水溶液。
4、水解度60%-70%的聚丙烯酰胺配制步骤:首先,把聚丙烯酰胺和水(约60%-70%的浓度)加入容器中,并将温度控制在50℃-60℃之间。在水中加入甘油/乙醇等溶剂,使溶液变得更浓。
5、阴离子型聚丙烯酰胺的运用作用与其“水解度”有很大的联系,“水解度”过小会导致混凝或助凝作用较差,“水解度”过大会增加制造本钱。一般将水解比控制在20%左右,水解时刻控制在2~4h。
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